異長春花堿脂質(zhì)體的制備及安全性評價

目的采用星點設計-效應面法優(yōu)化異長春花堿脂質(zhì)體的處方。方法以磷脂/藥(質(zhì)量比)、膽固醇/磷脂(摩爾比)、水化溫度為考察因素,以脂質(zhì)體的包封率和脂質(zhì)體的平均粒徑為指標,采用二次多項式方程描述考察指標和影響因素之間的數(shù)學關系,根據(jù)此數(shù)學模型描繪效應面,選擇最佳處方,并進行預測分析。結果所建立的考察指標和影響因素之間的數(shù)學模型具有較高的可信度。以優(yōu)化后的處方制備樣品,各指標實測值與預測值偏差較小。結論所建立的模型預測性良好,制備的脂質(zhì)體符合設計要求。

目的探討預防異長春花堿引起靜脈炎的護理方法。方法對我科自2006年11月～2007年10月采用深靜脈picc置管應用異長春花堿的34例患者護理方法進行分析。結果2例發(fā)生輕度靜脈炎,無滲漏發(fā)生。結論地塞米松及一些必要的護理方法對預防異長春花堿引起的靜脈炎的發(fā)生有良好的效果,值得臨床推廣。

為了研究長春花堿對鼠單卵裂球染色體標本制備的影響。以長春花堿為紡錘體中期阻斷劑,以czb為基礎培養(yǎng)液,研究不同的阻斷培養(yǎng)濃度和時間對小鼠4、8-細胞期胚胎單卵裂球中期分裂相數(shù)的影響。0.5μg/ml濃度、阻斷培養(yǎng)10h組的4-細胞卵裂球中期分裂相檢出率最高,而只有0.5μg/ml濃度6、h組,0.1μg/ml濃度8、h組,0.3μg/ml濃度、8h組,0.7μg/ml濃度、8h組,0.1μg/ml濃度、10h組和0.3μg/ml濃度1、0h組與最高值組差異不顯著;0.5μg/ml濃度、阻斷培養(yǎng)10h組的8-細胞卵裂球中期分裂相檢出率最高,而只有0.1μg/ml濃度1、0h組和0.7μg/ml濃度1、0h組與最高值組差異不顯著;0.1μg/ml濃度8、h阻斷培養(yǎng)的4-細胞單卵裂球的中期分裂相的檢出率與0.1μg/ml濃度1、0h阻斷培養(yǎng)的8-細胞單卵裂球的差異不顯著,其染色體標本的制備質(zhì)量評分分別為2.7和1.90為確定適宜小鼠早期胚胎單卵裂球的長春花堿處理濃度和阻斷培養(yǎng)時間提供了科學依據(jù)。

目的:對國內(nèi)外長春花主栽品種的長春質(zhì)堿含量和農(nóng)藝性狀進行了分析。方法:記錄長春花盛花期的農(nóng)藝性狀,反相高效認相色譜儀測定長春質(zhì)堿含量。結果:發(fā)現(xiàn)不同品種的長春質(zhì)堿含量和農(nóng)藝性狀均存在很大差異,太平洋系列(pacifica)品種polkadot(ppd)中長春質(zhì)堿質(zhì)量分數(shù)最高,達到葉片干重的3.79mg·g~(-1);清涼系列(cooler)品種pink(cp)中長春質(zhì)堿質(zhì)量分數(shù)最低,僅為葉片干重的0.9mg·g~(-1)。長春花中長春質(zhì)堿含量與農(nóng)藝性狀之間存在一定程度的相關性。通徑分析表明,長春花主要農(nóng)藝性狀中,節(jié)間距對長春質(zhì)堿含量的正影響達到了顯著水平(p<0.05),通徑系數(shù)為1.473。結論:本研究對高含量長春質(zhì)堿長春花引種和育種具有參考價值。

硝態(tài)氮緩解長春花幼苗海水脅迫效應的研究

目的研究鹽脅迫對長春花愈傷組織生長及阿瑪堿積累的影響。方法用濃度為0、50、100、150mmol/l的nacl處理長春花愈傷組織,測定其鮮質(zhì)量、干質(zhì)量、丙二醛(mda)量、光合速率、呼吸速率等生理指標和阿瑪堿的量。結果鹽脅迫顯著地降低了長春花愈傷組織的鮮質(zhì)量和干質(zhì)量,提高了mda量、光合速率和呼吸速率;在含有不同濃度nacl的培養(yǎng)基上生長30d后,愈傷組織的阿瑪堿量隨nacl濃度的增加而逐漸降低;用不同濃度的nacl溶液噴灑生長27d的愈傷組織,發(fā)現(xiàn)3d后50mmol/l處理的愈傷組織中阿瑪堿量比對照高出近1倍。結論長期鹽脅迫能夠抑制長春花愈傷組織的生長,同時引起阿瑪堿積累的減少;低濃度nacl噴灑處理則對長春花細胞中阿瑪堿的積累有較大的促進作用。

本文以長春花無菌苗的芽為外植體進行組織培養(yǎng)。適合芽誘導和增殖的培養(yǎng)基為ms+0.50mg/l6-ba+0.06mg/liba+30g/l蔗糖+7g/l瓊脂;適合生根的培養(yǎng)基為1/2ms+0.10mg/liba+0.20mg/lnaa+30g/l蔗糖+7g/l瓊脂。經(jīng)生根壯苗培養(yǎng)和煉苗25d后,移栽成活率高達92%。

文多靈(vindoline)具有重要的藥用價值。本文利用反相高效液相色譜法檢測了23種國內(nèi)外長春花主栽品種的文多靈含量,對文多靈含量與品種的12個主要農(nóng)藝性狀(包括株高、節(jié)間距、莖直徑、一級側枝數(shù)、葉片長、葉片寬、葉片長寬比、百片葉重、全株葉片重、花瓣直徑、種莢長度和種子數(shù)/莢)的相關性和通徑進行了分析。相關性分析表明,文多靈含量與一級側枝數(shù)、莖直徑、節(jié)間距、葉片寬、株高、全株葉片重、百片葉重、花瓣直徑和葉片長呈正相關,其中與一級側枝數(shù)和莖直徑的相關性達到顯著水平(p<0.05),與節(jié)間距的相關性接近顯著水平;與葉片長寬比、種莢長度和種子數(shù)/莢呈負相關。通徑分析結果表明,長春花的主要農(nóng)藝性狀中,節(jié)間距、一級側枝數(shù)和全株葉片重對文多靈含量的正影響達到了顯著水平(p<0.05),通徑系數(shù)分別為0.959、0.716和0.431,說明節(jié)間距、一級側枝數(shù)和全株葉片重可以作為高含量文多靈長春花品種選育的重要參考指標。

對感染黃化病的海南長春花植株,應用dapi熒光顯微技術對其嫩莖和葉柄進行了切片染色觀察,結果表明:在感病植株的韌皮部篩管分子中存在大量特異性的植原體dna熒光光點,而在健康植株的篩管分子則未發(fā)現(xiàn)有特異性的植原體熒光。另對其莖和葉柄中的植原體含量進行比較,結果顯示莖中的含量要比葉柄中稍高。

研究表明蕓苔素內(nèi)酯(br)對蔓長春花試管苗生根有促進作用。br使生根高峰提前、單株有效根數(shù)增多、生根率提高,iba對br有增效作用。

目的測定不同產(chǎn)地小蔓長春花中生物堿長春胺的含量。方法采用島津cs-930雙波長薄層掃描儀,單波長線形掃描,以長春胺為標準品,平行測定不同產(chǎn)地種植的小蔓長春花中(主要是葉子)長春胺的含量。結果各樣品中長春胺的含量隨其生長環(huán)境及生長季節(jié)而不同。結論本法簡便可靠,可作為小蔓長春花種植及資源合理利用的檢測手段。

目的:通過愈傷組織的誘導、增殖與培養(yǎng)條件的優(yōu)化建立長春花愈傷組織培養(yǎng)體系。方法:以長春花的幼嫩葉片為外植體,在不同激素組合的脫分化、分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)。考察抗氧化劑vc對愈傷組織褐化的影響。結果:最佳誘導培養(yǎng)基為ms+1.0mg/l6-ba+0.5mg/l2,4-d;最佳繼代培養(yǎng)基為ms+2.0mg/l6-ba+0.5mg/lnaa+0.5mg/l2,4-d,并在該條件下進一步懸浮繼代培養(yǎng)。10mg/lvc可有效抑制長春花愈傷組織的褐化。結論:激素kt對該愈傷組織的誘導效應不明顯,naa、2,4-d和6-ba均有一定的誘導效應;vc具有抑制長春花愈傷組織褐化的作用。

應用正交試驗對長春花盆栽生產(chǎn)基質(zhì)進行了研究。結果表明:泥碳∶珍珠巖∶鋸木屑∶菇渣為3∶1∶2∶1(體積比)為最佳組合。

本文就長春花體內(nèi)生物堿生物合成途徑中受轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控、外界因素對其誘導和調(diào)控以及作用機制的研究進展作介紹。

研究了細胞質(zhì)膜鈣通道阻斷劑氯化鑭(lacl3)、胞內(nèi)ip3通道阻斷劑肝素(heparin)、胞內(nèi)cam活性抑制劑三氟啦嗪(tfp)對長春花光合作用的影響,結果發(fā)現(xiàn):ca2+通道阻斷劑處理后長春花葉片凈光合速率(pn)、psii最大量子產(chǎn)量(fv/fm)、psⅱ實際量子產(chǎn)量(yield)、電子傳遞速率(etr)、光化學淬滅系數(shù)(qp)均下降,非光化學淬滅系數(shù)(qn)及chla、chlb、chla+chlb含量上升,表明ca2+通道阻斷劑對長春花的光合作用有較大影響,且不是通過加速葉片光合色素降解或抑制其合成來實現(xiàn)抑制葉片的光合能力;其中heparin處理的長春花葉片相關參數(shù)變化幅度最大,表明胞內(nèi)鈣庫通過ip3通道釋放的ca2+在長春花葉片光合作用過程中發(fā)揮了更積極的作用.

目的:為提高長春花中有效成分生物堿的含量,利用秋水仙素誘導出長春花同源四倍體,為獲得優(yōu)質(zhì)長春花四倍體株系打下基礎。方法:以秋水仙素為誘導劑,對實生苗頂芽進行處理,考察不同濃度和不同的處理時間對誘導率的影響。對獲得的變異株通過形態(tài)、染色體計數(shù)、流式細胞術等方法進行鑒定,篩選出同源四倍體。結果:毛細管法誘導實體幼苗的頂芽效果較好,0.1%秋水仙素處理72h和0.2%處理48h,四倍體的誘導率分別達到46%和58%。各處理組共獲得四倍體38株,四倍體的性狀發(fā)生了明顯變化,莖、葉、花、果變大,四倍體單株干重也高于二倍體。

目的:獲得膽木莖木、皮及葉中有效成分異長春花苷內(nèi)酰胺含量高低的研究結果,為挖掘膽木新的藥用部位奠定科學基礎。方法:采用薄層色譜法,對膽木的莖木、皮、葉中異長春花苷內(nèi)酰胺化學成分進行定性鑒別;同時采用高效液相色譜技術對該3個部位中異長春花苷內(nèi)酰胺含量高低進行檢測。結果:膽木莖木、皮及葉的薄層色譜圖中均出現(xiàn)異長春花苷內(nèi)酰胺藍色熒光斑點;且莖木、皮、葉中異長春花苷內(nèi)酰胺含量值分別為1.22%,1.08%,1.54%。結論:定性鑒別和含量測定的實驗結果均表明:膽木莖木、皮、葉中均含有效成分異長春花苷內(nèi)酰胺,且葉中含量相對較高、皮中含量相對較低。

目的建立長春花總黃酮的含量測定方法,探討不同產(chǎn)地長春花中黃酮的含量水平。方法長春花藥材以石油醚除去葉綠素等色素后,以甲醇熱回流提取總黃酮,經(jīng)分光光度法測定總黃酮的含量。結果該方法的的線性范圍為:8.192~40.96μg@ml-1,回收率為99.0%,適宜于長春花中總黃酮的含量測定;所測定的不同產(chǎn)地長春花中總黃酮的含量在0.64~2.25mg·g-1之間。結論不同產(chǎn)地的長春花中總黃酮的含量水平差異非常顯著。

【目的】分析感柑橘黃龍病長春花植株與健康長春花植株不同部位內(nèi)生細菌菌群結構變化,為柑橘黃龍病菌與長春花內(nèi)生細菌的相關性研究提供理論基礎?！痉椒ā勘狙芯坷眉嫘詤捬蹩膳囵B(yǎng)技術、16srdna限制性片段長度多態(tài)性分析(restrictionfragmentlengthpolymorphism,rflp)以及16srdna序列分析相結合的方法?！窘Y果】分別從感病和健康長春花葉、莖、根的組織中分離獲得67株內(nèi)生細菌,與genbank中29種細菌的相似性達到97%-100%。其中短小桿菌屬(curtobacteriumsp.)、歐文氏菌屬(erwiniasp.)、蠟樣芽胞桿菌(bacilluscereus)為感病長春花內(nèi)生細菌的優(yōu)勢菌群,鞘胺醇單胞菌屬(brevundimonassp.)、芽胞桿菌屬(bacillussp.)為健康長春花內(nèi)生細菌的優(yōu)勢菌群;馬胃葡萄球菌(staphylococcusequorum)為兩者的共同優(yōu)勢菌群。通過rflp方法分析,感病株得到16個、健株得到23個操作分類單元(operationaltaxonomicunits,otus),感病植株中除柑橘黃龍病菌candidatusliberibacterasiaticus外,還有豐富的candidatusliberibactersp.存在?！窘Y論】感病與健康長春花植株中均含有豐富的內(nèi)生細菌,黃龍病菌的存在改變了長春花原有內(nèi)生細菌的菌群結構,且菌群多樣性下降?？梢婇L春花內(nèi)生細菌在一定程度上受到柑橘黃龍病菌的抑制。

在銀川地區(qū)引種雜交矮化長春花catharanthusniraanaapricot等12個品種,進行種苗培育,觀察其生長發(fā)育過程中的性狀表現(xiàn).探求各品種在本地區(qū)環(huán)境條件和栽培管理條件下,不同品種之間品質(zhì)差異.結果表明:12個品種均能適應銀川地區(qū)栽培;嫩枝帶葉扦插成活率較高;且溫室栽培生長發(fā)育良好.植株矮化,豐滿,花大,色艷.

目的:研究大孔樹脂吸附分離純化異長春花苷內(nèi)酰胺的工藝,為異長春花苷內(nèi)酰胺的工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。方法:采用靜態(tài)吸附-解吸方法,從10種大孔吸附樹脂篩選出最佳樹脂,另外采用單因素影響試驗,對吸附量、水洗脫體積、乙醇洗脫濃度及體積進行了考察。結果:hpd400大孔樹脂對異長春花苷內(nèi)酰胺的吸附及解吸附效果最好,樹脂的最佳吸附量為20.23mg.g-1,水及30%乙醇洗脫體積為6bv,70%乙醇洗脫體積為4bv。結論:該法簡單可行,分離效果好,對大生產(chǎn)有一定指導作用。