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以蝴蝶蘭自交品種NOⅡ的無菌苗葉片為試材,采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn),比較不同酶的種類、酶液濃度、材料和酶液的比例、滲透壓、酶解時(shí)間及純化條件對(duì)原生質(zhì)體產(chǎn)量和活性的影響,并用熒光顯微鏡觀察去壁情況。結(jié)果表明:在同一種條件下1 g蝴蝶蘭葉片加入10 mL酶解液中,酶解液含1.0%纖維素酶R-10,1.0%果膠酶,0.5 mol·L~(-1)甘露醇,酶解3 h,有活力的原生質(zhì)體產(chǎn)量最高,其產(chǎn)量為1.3×10~5個(gè)·g~(-1),活性達(dá)81.90%。
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采用PEG(聚乙二醇)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,進(jìn)行了Page桔柚(Citrus reticulata Blanco×C.grandis Osb.cv.Page)九里香(Murraya paniculate Jack.)的體細(xì)胞雜交,培養(yǎng)獲得了40株再生植株,經(jīng)細(xì)胞學(xué)檢查和同工酶分析鑒定,確認(rèn)有2株為Page桔柚九里香的體細(xì)胞雜種植株,它們均為四倍體(2n=4x=36),具有雙親綜合的谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)
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