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更新時間：2025.04.05
草珊瑚與金粟蘭葉片雙位點特異性PCR鑒別方法研究

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篩選獲得草珊瑚與金粟蘭鑒別的特異位點并建立雙位點特異性PCR方法,用于鑒別草珊瑚與金粟蘭葉片以及兩者的混雜品。采集不同產(chǎn)地的草珊瑚18份、金粟蘭6份,所有樣品提取總DNA,并對草珊瑚與金粟蘭干燥葉片進行DNA提取。通過對其ITS片段進行擴增、測序,并搜索GenBank數(shù)據(jù)庫中收錄的草珊瑚與金粟蘭的ITS序列,進行同源比對后根據(jù)其變異位點設(shè)計特異性鑒別引物,構(gòu)建多重PCR體系,并優(yōu)化PCR條件,對草珊瑚與金粟蘭葉片進行快速分子鑒定。構(gòu)建了多重PCR鑒別體系,只經(jīng)一個PCR反應(yīng),能擴增出草珊瑚580 bp的特異性鑒別條帶及金粟蘭470 bp的特異性片段,可快速鑒別草珊瑚與金粟蘭葉片,并可判斷相互是否混雜。使用雙位點特異性PCR技術(shù)可以有效快速鑒別草珊瑚與金粟蘭葉片,并可判斷相互是否混雜。

UHPE-HPLC法測定杜仲茶中桃葉珊瑚甙的含量

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目的:建立杜仲茶中桃葉珊瑚甙含量測定的超高壓提取(UHPE)-高效液相色譜(HPLC)分析法。方法:采用正交試驗考察超高壓提取壓力、提取時間、料液比和甲醇濃度對提取桃葉珊瑚甙的影響,以HPLC法為含量測定方法。結(jié)果:最佳提取桃葉珊瑚甙的條件為超高壓提取壓力350 MPa、時間3 min、料液比1:8、70%甲醇。HPLC法測定桃葉珊瑚甙的線性范圍在5~100μg/ml,相關(guān)系數(shù)為0.9998。杜仲茶中桃葉珊瑚甙的含量為1.94%,相對標準偏差為3.02%,加標回收率為97.40%~100.16%。結(jié)論:此法簡單、快速、經(jīng)濟,是測定杜仲茶中桃葉珊瑚甙含量的有效方法。

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